Alkaloids, widely present in herbs, have attracted the attention of phytochemists for over 150 years due to their potential value as medicinal agents or their toxic principles. In this work we developed a method for targeted and untargeted alkaloid investigation that automatically combines SPE-on line sample purification with UHPLC/ESI/High Resolution Mass Spectrometry (Q-Orbitap) detection. Thirty-five alkaloids were quantified in comparison with analytical standards, 48 were putatively identified and confirmed using the chromatographic retention time and the fragmentation profile obtained analysing the extracts of plants already well-documented in the literature, and further 200 using an in-house database built from literature information on exact mass and isotopic pattern. Besides, the alkaloid profile of 67 single herbage plants, characteristic of the local alpine flora, and that of 48 herbal mix samples representative of the exact daily intake of 8 cows grazing in three consecutive days on two distinct alpine pastures in north-eastern Italy, was described. Moreover, also the corresponding 48 milks produced by those cows were analysed. Among the quantified alkaloids, the most abundant were Lycopsamine and Gramine (42 and 31% of pasture samples, and 52 and 44% of milks, respectively; contents from 0.4 to 80 μg kg-1 in herb, and 0.04-0.4 μg L-1 in milk). The untargeted analysis found over 120 different alkaloids in herbal mixes and roughly 40 in milks.

Les alcaloïdes, très répandus dans les herbes, ont attiré l’attention des phytochimistes depuis plus de 150 ans, du fait de leur potentiel comme agents médicinaux ou de leurs propriétés toxiques. Ce travail a développé une méthode pour la détection ciblée et générale d’alcaloïdes, qui combine automatiquement la purification de l’échantillon par voie de SPE online avec UHPLC / ESI / High Resolution Mass Spectrometry (Q-Orbitap). Trente-cinq alcaloïdes ont été quantifiés par rapport aux normes analytiques pures. Quarante-huit alcaloïdes ont été confirmés en utilisant le temps de rétention chromatographique et le profil de fragmentation, en analysant les extraits d’herbes déjà bien documentées dans la littérature, et 200 autres alcaloïdes ont été provisoirement identifiés en utilisant une base de données construite à partir d’information de la littérature concernant les masses exactes et des motifs isotopiques. D’abord, le profil de composition de 67 plantes herbacées distinctes qui composent la flore alpine locale a été établi. Ensuite, 48 échantillons de mélange à base de plantes représentatives de l’ingestion quotidienne de la vache, recueillies à partir de deux alpages dans le nord-est de l’Italie, et 48 échantillons de lait produits par les vaches au pâturage sur ces alpages, ont été analysés. En ce qui concerne le contenu des 35 alcaloïdes quantifiés, lycopsamine et gramine étaient les plus répandues (42 et 31% des échantillons de pâturage, et 52 et 44% des laits, respectivement) avec une distribution de concentration dans les herbes de 0,4 à 80 μg kg-1 et dans le lait de 0.04-0.4 μg L-1. Plus de 120 alcaloïdes différents ont été détectés avec une analyse non ciblée dans les mélanges à base de plantes et à peu près 40 dans les laits.