Protocol G - Inactivation of sperm DNA by UV-light [Pratical guide of protocols: chromosome set manipulation]

Gynogenesis and androgenesis are terms that describe uniparental reproduction with exclusively maternal and paternal inheritance, respectively. The production of uniparental inheritance individuals under experimental conditions requires genome inactivation of sperm, in the case of the gynogenesis, or the destruction of egg DNA, in the case of the androgenesis, previously to the fertilization. Genome inactivation can be achieved by ionizing irradiation, UV-irradiation or by chemical treatments. Although ionizing irradiation continues being used for irradiating eggs, UV-irradiation has become the most common method used for sperm DNA inactivation. The UV-irradiation is the common procedure in order to inactivate sperm DNA. However, the optimization of the intensity of Uvirradiation requires a careful analysis based on the induction of the Hertwig effect. A detailed analysis of treatment variables and UV irradiation conditions are discussed in the present Protocol in order to completely inactivate sperm DNA in sea bass.

La gynogenèse et l'androgenèse sont des termes qui décrivent la reproduction exclusivement uniparentale à partir de l'héritage maternel ou paternel, respectivement. Ces types de reproduction dans des conditions expérimentales exigent l'inactivation du génome du sperme dans le cas de la gynogenèse, ou la destruction de l'ADN des ovules dans le cas de l'androgenèse, et cela antérieurement à la fécondation. L'inactivation du génome peut être réalisée par une irradiation ionisante, par une irradiation aux ultraviolets ou par des traitements chimiques. Bien que l'irradiation ionisante continue d'être utilisée pour l'irradiation des œufs, l'irradiation par UV est la procédure la plus couramment utilisée pour l'inactivation de l'ADN des spermatozoïdes. Toutefois, elle implique de déterminer les doses les plus appropriées à l'inactivation complète de l'ADN du sperme et une analyse minutieuse du déclenchement de l'effet Hertwig. Le présent protocole propose une analyse détaillée des variables et des conditions d'irradiation aux ultraviolets pour inactiver complètement l'ADN des spermatozoïdes chez le bar.



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Protocol G - Inactivation of sperm DNA by UV-light [Pratical guide of protocols: chromosome set manipulation]. In : Felip A. (ed.), Carrillo M. (ed.), Herráez M.P. (ed.), Zanuy S. (ed.), Basurco B. (ed.). Advances in fish reproduction and their application to broodstock management: a pratical manual for sea bass. Zaragoza : CIHEAM / CSIC-IATS, 2009. p. 49-52. (Options Méditerranéennes : Série B. Etudes et Recherches; n. 63).